Fattori che influenzano l'effetto di rimozione del virus
Fattori che influenzano l'effetto di rimozione del virus
La filtrazione per la rimozione dei virus può rimuovere in modo significativo i virus nelle soluzioni e il suo effetto di rimozione è correlato a dove avviene la filtrazione per la rimozione dei virus, alla concentrazione proteica del liquido di alimentazione, alla pressione di filtrazione, al tempo di conservazione e alla crioconservazione, ecc.
1. Dove avviene la filtrazione per la rimozione dei virus
La filtrazione per la rimozione del virus può avvenire ovunque nella purificazione a valle, ma di solito avviene dopo l'inattivazione del virus a basso pH, passaggi cromatografici intermedi o passaggi cromatografici finali. Nel complesso, durante tutto il processo a valle, i requisiti effettivi di filtrazione dipendono fortemente da dove si trova la fase di filtrazione del virus nel processo, poiché la concentrazione proteica, la purezza e i volumi di processo possono variare.
2. Concentrazione proteica del liquido di alimentazione
La concentrazione proteica del campione influenzerà il flusso della filtrazione per la rimozione del virus attraverso l'interazione tra la soluzione di alimentazione e la sacca a membrana. Una maggiore concentrazione proteica ridurrà la velocità del processo di filtrazione per la rimozione del virus. È anche correlato alle proprietà della proteina stessa e della membrana stessa. Di solito, la concentrazione del prodotto viene ridotta durante la diluizione continua del prodotto per aumentare la capacità e la portata della membrana filtrante per la rimozione del virus.
3. Pressione di filtrazione
Il processo di filtrazione per la rimozione dei virus deve generalmente garantire una filtrazione continua. Perché l'interruzione della pressione può portare alla penetrazione del virus. Il principio è: l'effetto convettivo del liquido di alimentazione che scorre attraverso il filtro fa sì che le particelle virali vengano intrappolate sulla superficie della membrana o intrappolate nella dimensione dei pori più piccola a causa dell'esclusione della dimensione molecolare. Quando la pressione diminuisce, la portata e l'effetto di convezione diminuiscono. Il virus fuggirà e rilascerà dai piccoli pori e si diffonderà ai grandi pori con un'alta probabilità di penetrare.
4. Tempo di conservazione e crioconservazione
Alcune proteine formano aggregati durante il processo di conservazione, specialmente durante la crioconservazione. Questi aggregati possono avere un impatto sulla filtrazione della rimozione dei virus. Pertanto, è necessario valutare se c'è un lungo periodo di conservazione nel processo di produzione o quando è necessaria la crioconservazione.
