La tecnologia guida ti porta ad apprendere il metodo semplice ed efficiente di dissalazione e concentrazione
Le proteine spesso necessitano di essere dissalate dopo la separazione e la purificazione e questi sali derivano principalmente da vari ioni presenti negli organismi viventi (ad es. ioni sodio, ioni potassio, ioni cloruro, ecc.) nonché sali tampone negli estratti, sali eluenti e componenti salini di alcuni denaturanti utilizzati per gli esperimenti. Un'elevata concentrazione di sale può influenzare l'attività e la stabilità delle proteine nonché le loro interazioni con altre molecole, generando segnali interferenti o riducendo l'accuratezza delle misurazioni in successivi metodi analitici come elettroforesi, spettrometria di massa e studi cristallografici. Pertanto, è molto necessario dissalare le proteine purificate dopo la separazione e i principali metodi di dissalazione spesso utilizzati sono la cromatografia su membrana (dialisi e ultrafiltrazione) e la filtrazione su gel. Inoltre, in alcuni casi, la desalinizzazione può essere ottenuta anche mediante diluizione.
Desalinizzazione per dialisi, a causa del lungo ciclo e della necessità di un gran numero di liquidi sostitutivi, la sua applicazione è stata notevolmente limitata ed è meno utilizzata nell'industria, ma principalmente in parte utilizzata in laboratorio, anche il laboratorio viene gradualmente sostituito da tubi di ultrafiltrazione /tazza per ultrafiltrazione.
La principale tecnologia di separazione a membrana utilizzata nel processo di dissalazione e concentrazione delle proteine è l'ultrafiltrazione. L'ultrafiltrazione è una tecnologia di separazione a membrana ad alta efficienza, basso consumo energetico, nessun cambiamento di fase, nessuna necessità di aggiungere reagenti chimici, funzionamento facile, condizioni blande, capacità di mantenere meglio l'attività delle macromolecole biologiche, alto tasso di recupero e altri vantaggi e il suo utilizzo nella separazione e purificazione delle proteine presenta vantaggi unici.
L'ultrafiltrazione è un metodo di filtrazione su membrana che utilizza una membrana porosa come mezzo di separazione e si basa sulla differenza di pressione tra i due lati della membrana come forza motrice per separare sostanze di diverso peso molecolare in soluzione, svolgendo così un ruolo nella desalinizzazione, concentrazione e purificazione. Si tratta di un nuovo metodo sviluppato negli ultimi anni, particolarmente adatto per la concentrazione o la desalinizzazione di macromolecole biologiche, in particolare proteine ed enzimi. La chiave per l'applicazione dell'ultrafiltrazione è la scelta della membrana, diversi tipi e specifiche della membrana, hanno la differenza nella portata dell'acqua, nel limite del peso molecolare e in altri parametri, deve essere selezionata in base alle pertinenti esigenze di lavoro. Inoltre, la forma del dispositivo di ultrafiltrazione, la composizione e le proprietà del soluto, la concentrazione della soluzione, ecc. hanno una certa influenza sull'effetto dell'ultrafiltrazione.
L'applicazione della tecnologia di ultrafiltrazione per la dissalazione e la concentrazione delle proteine nel processo di purificazione delle proteine è caratterizzata dalla sua idoneità al trattamento di grandi quantità di liquidi che vanno da poche centinaia a poche migliaia di litri con i vantaggi di semplicità di funzionamento, risparmio di tempo e un alto tasso di recupero proteico. Il metodo di ultrafiltrazione deriva da tubi di ultrafiltrazione per la lavorazione di microvolumi di laboratorio, tazze di ultrafiltrazione per la lavorazione di piccoli volumi e sistemi di ultrafiltrazione per uso industriale.
L'ultrafiltrazione è suddivisa in ultrafiltrazione a pressione diretta e filtrazione a flusso tangenziale e, attualmente, la filtrazione a flusso tangenziale viene utilizzata principalmente nell'industria, che è ampiamente utilizzata nella desalinizzazione e nella sostituzione del buffer.
Quello che segue è un esempio dell'applicazione delle cassette a membrana di ultrafiltrazione di Guidling Technology nella desalinizzazione e concentrazione delle proteine.
Abbiamo utilizzato una cassetta con membrana con dimensione dei pori {{0}}.11㎡ 10 kd (G01100010K) per dissalare e concentrare 500 ml di soluzione di ormone della crescita modificato con PEG a una concentrazione di 0,2 mg/ml. Durante tutto il processo di ultrafiltrazione, sono stati esaminati il tasso di desalinizzazione, il tasso di recupero delle proteine, la condizione di guasto del flusso della membrana e il tasso di recupero del flusso d'acqua.
Prima e dopo l'uso, abbiamo testato separatamente il flusso d'acqua della cassetta a membrana e il tasso di recupero delle cassette a membrana ha raggiunto il 98% con la premessa di mantenere la stessa velocità di alimentazione, pressione di alimentazione e pressione di riflusso.
L'intero processo ha elaborato un totale di 2 litri di materiale e ha richiesto 40min, 0-5min era il processo di concentrazione, 5-35min era il processo di scambio di liquidi e 35-40min era il processo di eccessiva concentrazione. Durante tutto il processo di ultrafiltrazione, il TMP è stato stabilizzato tra 0,7-0,8 bar, la velocità di alimentazione era costante e il flusso medio di materiale era di 27 LMH.
2 litri di materiale concentrato liquido scambiano con 60 ml, circa 33 volte concentrato, il tasso di desalinizzazione raggiunge il 99%, il tasso di recupero raggiunge l'80%, dopo un lavaggio, un aumento di 50 ml di liquido, il recupero totale dell'88%, produzione industriale secondo il volume morto dei calcoli della tubazione, per quanto possibile, aumenta il numero di volte del lavaggio superiore, il lavaggio superiore generale 3 volte può essere completamente recuperato.
Le cassette a membrana Guidling Technology sono realizzate con materiali inerti di grado medico con forte resistenza alla corrosione e possono resistere a una forte pulizia alcalina; l'uso di processi di produzione automatizzati garantisce la continuità e l'affidabilità della qualità del prodotto, una maggiore resistenza meccanica, resistenza alla contropressione e prestazioni di risciacquo ripetute; ha una super idrofilicità, che può conferire alla membrana un flusso più elevato e un minore adsorbimento delle proteine; abbiamo anche un design ottimizzato del canale di flusso con una caduta di pressione minore che facilita il trasferimento del materiale e riduce significativamente il tempo di filtrazione.
Le nostre cassette a membrana sono disponibili in un'ampia gamma di dimensioni dei pori, da 1kd a 1000kd. Tra questi, le cassette a membrana per ultrafiltrazione 1-10kd possono essere utilizzate per la desalinizzazione e la rimozione dei pirogeni; Le cassette con membrana per ultrafiltrazione da 30 kd possono essere utilizzate per la concentrazione di anticorpi monoclonali e la sostituzione del tampone; allo stesso tempo, i nostri prodotti a fibra cava possono essere utilizzati anche per la concentrazione e la sostituzione di prodotti biologici, con dimensioni dei pori di 100kd, 300kd e 500kd, che vengono utilizzati principalmente per un gran numero di applicazioni nei prodotti vaccinali.
Guidling Technology è un'impresa high-tech nazionale specializzata in prodotti biofarmaceutici, colture cellulari, purificazione e concentrazione di biomedicina, diagnosi e fluidi industriali. Abbiamo sviluppato con successo dispositivi di filtraggio centrifugo, cassette di ultrafiltrazione e microfiltrazione, filtri antivirus, sistemi TFF, filtri di profondità, fibre cave, ecc. Che soddisfano pienamente gli scenari applicativi di prodotti biofarmaceutici, colture cellulari e così via. Le nostre membrane e filtri a membrana sono ampiamente utilizzati nella concentrazione, estrazione e separazione di prefiltrazione, microfiltrazione, ultrafiltrazione e nanofiltrazione. Le nostre numerose linee di prodotti, dalla piccola filtrazione da laboratorio monouso ai sistemi di filtrazione di produzione, test di sterilità, fermentazione, coltura cellulare e altro ancora, soddisfano le esigenze di test e produzione. Guidling Technology non vede l'ora di collaborare con te!
